荧光量子产率检测仪—— 荧光发光效率检测系统——广州景颐光电科技有限公司是一家生产积分球光功率检测仪的厂家
荧光量子产率(ΦF)是吸收的光子与通过荧光发射的光子的比率。它的数值在通常情况下总是小于1。ΦF的数值越大则化合物的荧光越强,而无荧光的物质的荧光量子产率却等于或非常接近于零。因此测量ΦF即可以反映出荧光物质的光强,对其进行准确测定是很有必要的。
荧光量子产率的测定方法分为法和相对法,法量子产率的测量需要复杂的仪器,测试成本昂贵。而相对法是选择一种已知量子产率的标准品作为参照,通过对标准物和样品进行吸光度和荧光的测量换算得到样品的量子产率。相对法量子产率的测量不需要复杂而昂贵的仪器,是运用广泛的量子产率测量方法之一,掌握荧光量子产率的测量方法对理解荧光的原理以及荧光材料的性能表征和应用等方面都是非常重要的。
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激发光谱校正
仪器的激发光谱能量在不同波长下并不是一个恒定值,而是受到光源和激发单色器等的影响,有一个分布特征曲线。只有消除了这个曲线的影响,才能得到物质本身的真实激发光谱。
式中:Sex(λ)为物质的真实激发光谱; S ′ ex Sex′ (λ)为物质的未校正激发光谱;G(λ)为仪器激发光谱综合响应特征系数。
对激发光谱进行校正就是要得到G(λ)系数[11]。罗丹明B量子计数器标准溶液在激发波长250~600 nm波长范围内具有吸收恒定、量子产率不随波长变化,激发光谱为水平直线的特性[11],如图4所示。将罗丹明B量子计数器放入测量光路中,如图5所示。仪器发射波长固定在640 nm,执行250~600 nm的激发光谱扫描,此时得到的激发光谱便是G(λ)。
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测量原理
荧光量子产率测量系统采用法测定方式,是对积分球测量得到的荧光物质的真实荧光光谱直接进行计算的方法。因为样品散射出的光大部分都被积分球收集并进入荧光分光光度计的发射单色器中,所以可以使用光谱中的峰面积数据代替样品散射出的光子数进行计算。与荧光量子效率相关的变量有吸收率、外量子效率和内量子效率,内量子效率即为荧光量子产率的定义。仪器经过光谱校正后,分别测量空白样品和荧光样品的真实发射光谱,如图8和图9所示,计算方法如式 (5) ~ (7)。新研制的荧光量子产率分析软件可自动计算得出样品的量子产率数值,如图10所示。
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